Иммуноферментный анализ

Иммуноферментный анализ (ИФА) — это современный лабораторный метод, позволяющий выявлять в крови животного специфические антитела или антигены, связанные с различными заболеваниями. С его помощью можно определить не только возбудителя, но и стадию болезни.

Применение в ветеринарной практике:
ИФА широко используется в следующих клинических ситуациях:

• диагностика инфекционных заболеваний через выявление специфических антител;
• определение антигенов возбудителей;
• оценка гормонального фона животного;
• диагностика аутоиммунных заболеваний.

Преимущества метода:

• высокая точность и чувствительность (более 90%);
• возможность отслеживать динамику заболевания по изменению уровня антител;
• оперативность получения результатов и широкая доступность;
• минимальная инвазивность (анализ проводится по крови).

Ограничение метода:
ИФА выявляет не сам патоген, а иммунный ответ организма на него — то есть антитела.

---

Как работает ИФА

Существует несколько разновидностей иммуноферментного анализа (прямой, непрямой, конкурентный, метод блокирования), но в ветеринарии чаще применяется твердофазный гетерогенный метод — ELISA.

Принцип действия основан на иммунной реакции «антиген–антитело», в результате которой происходит изменение ферментативной активности специфических меток на антителах. Этапы анализа:

1. На дно лунок планшета нанесен антиген возбудителя. При добавлении сыворотки крови происходит связывание антигена с антителами (если они присутствуют).
2. Затем добавляется фермент-меченый конъюгат, который вступает в реакцию и вызывает образование окрашенного вещества.
3. Степень окрашивания напрямую связана с количеством антител в образце.
4. Спектрофотометр измеряет оптическую плотность, а программное обеспечение сравнивает её с контрольными значениями и рассчитывает результат.

Каждая тест-система имеет собственные референтные значения, поэтому интерпретация результатов возможна только в рамках той лаборатории, где выполнялся анализ. Сравнивать данные, полученные в разных лабораториях, некорректно.

---

Классы антител и сроки их появления

• IgM — первые антитела, обнаруживаются через 1–3 недели после инфицирования. Их наличие указывает на острую фазу или обострение хронического процесса. В среднем циркулируют до 3 месяцев, но могут сохраняться дольше.
• IgG — появляются примерно через 4 недели после заражения. Их уровень растет в течение 1,5–2 месяцев, после чего стабилизируется. Высокий титр может указывать на перенесенное заболевание или иммунитет.

Интерпретация результатов:

• Только IgM — острая инфекция.
• IgM + IgG — недавно перенесенное первичное заражение или обострение хронического процесса.
• Только IgG — либо наличие иммунитета, либо хроническое течение. Важна оценка титра и его динамика.

Для достоверной оценки динамики уровень антител следует отслеживать в одной и той же лаборатории с интервалами в 2–6 недель.